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使用液相色譜儀要滿足這些條件

更新時(shí)間:2020-04-23  |  點(diǎn)擊率:2435
   使用液相色譜儀要滿足這些條件
  液相色譜儀是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。儀器由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。
  色譜條件一般包括流動(dòng)相、色譜柱、檢測(cè)波長(zhǎng)、流速及進(jìn)樣量。流動(dòng)相就涉及到配制流動(dòng)相所用到的水和試劑試液,水一般要求用超純水或其他水的電阻率不大于18.2兆歐級(jí)別,試劑試液要求用色譜級(jí)別的,原因?yàn)榉乐顾驮噭┰囈褐械碾s質(zhì)對(duì)色譜結(jié)果的干擾。色譜柱會(huì)因不同的品種而有不同的要求,但每根色譜柱都有它的清洗要求,這個(gè)在色譜柱說明書上都可以找到,一定要根據(jù)上面的要求進(jìn)行,否則會(huì)造成液相色譜儀色譜柱效下降和色譜柱的使用壽命縮短,檢測(cè)波長(zhǎng)也會(huì)因品種的不同有不同的要求,這里需要指出的是要注意觀察檢測(cè)器氘燈能量的變化,比如基線波動(dòng)大,活性成分的響應(yīng)值突然變小等,都有可能是氘燈的能量不足所引起的,氘燈一般建議使用800小時(shí),但實(shí)際上使用時(shí)間不止,可根據(jù)實(shí)際情況更換。流速也因品種的不同而不同,一般為1.0ml/min,流速是不可隨意改動(dòng)的,特別是作為QC人員,但是作為研發(fā)人員,有時(shí)為了摸索條件或進(jìn)行方法耐用性驗(yàn)證,會(huì)對(duì)流速進(jìn)行改變以評(píng)價(jià)方法的適用性。對(duì)于進(jìn)樣量因不同的品種也有不同規(guī)定,進(jìn)樣量這塊現(xiàn)在都使用自動(dòng)進(jìn)樣,所以進(jìn)樣精密度都很好,不需強(qiáng)調(diào)什么。
  隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離成為解決生化分析問題有前途的方法。液相色譜儀具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。
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